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Scat-3细胞系FRET光谱成像

本网页为滨松绝对量子产率分析仪Quantaurus-QY在实际使用中的FAQ。
 

所用相机:
        Flash 4.0(C11440-22CU)
成像方法:
        FRET,宽场荧光成像
显微镜物镜:
        EC Plan-NeoFluar 40x 1.3 Oil

拍摄条件:
        250ms曝光时间


# 详细描述


我们的体系中有一个电压控制的光谱分光滤光片,可以控制通过的荧光信号波长,其波长分辨率为10nm。采用这套系统,我们就可以将荧光信号没10nm取一个荧光强度数值,进行校正后即可得到样品荧光的光谱数据。 图中的样品为Scat-3细胞系,其中转了CFP-Venus FRET 系统,将CFP和Venus两个荧光蛋白通过一段很短的序列连在了一起,这个序列为Caspase-3的酶切位点,而Caspase-3是细胞凋亡过程中会大量表达的一个蛋白。所以在细胞没有凋亡的时候,CFP和Venus是在一起的,会有FRET信号;而当细胞进入凋亡流程,大量表达的Caspase-3会剪切其酶切位点,使得CFP和Venus分开,FRET信号减弱。

 

针对以上内容,如您有任何问题,欢迎联系我们


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