神经细胞膜电位变化的荧光成像_滨松光子学商贸(中国)有限公司

神经细胞膜电位变化的荧光成像

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本网页为滨松绝对量子产率分析仪Quantaurus-QY在实际使用中的FAQ。

所用相机：
        ORCA-Flash4.0 V3(C13440-20CU)
成像方法：
        宽场荧光
应用描述：
        电压敏感的荧光蛋白定位于细胞膜上，与离子通道相偶联。神经细胞的膜电位变化会引起该蛋白荧光强弱的变化，从而使膜电位“可视化”。传统的CCD或普通高速CMOS相机由于灵敏度和帧速上限太低，往往和肉眼观察一样，分辨不出荧光信号的快速变化；该实验使用滨松Flash4.0 V3，在USB 3.0的连接方式下将帧速提高至1,0000 fps，使1 ms内的荧光变化也能够清晰的呈现出来。

# 详细描述

该实验使用胚胎期电转质粒的方式，让小鼠脑部特定类群的神经元表达电压敏感的荧光蛋白ASAP1，配合膜片钳系统对脑片中被标记的神经元给予电刺激，使其膜电位产生变化；同时利用Flash4.0 V3的超高速成像能力，捕捉荧光信号的实时变化。

1. 在512*128的ROI（region of interst）下，可以用1600 fps的帧速记录单个神经细胞胞体的膜电位变化。

2. 在512*8的ROI下，其帧速可以达到10000 fps。在该尺度下可以达到每个电位的Spike记录5-10个采样数据点，且其信号的信噪比仍然很好。

3. 成像系统配置：Olympus BX51WI + Hamamatsu Flash4.0 V3

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