小鼠心脏高速荧光钙成像
本网页为滨松绝对量子产率分析仪Quantaurus-QY在实际使用中的FAQ。
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所用相机:
ORCA-Flash 4.0(C11440-22CU)
成像方法:
高速荧光成像,离子成像
显微镜物镜:
Zeiss PlanApos 1.0x
拍摄条件:
曝光时间10ms,100Hz速度高速拍摄(演示视频相对原速放慢了10倍)
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GCaMPs是以单个荧光蛋白为基础构建而成,可以定位到特定的细胞亚型或细胞器,对整体动物或者组织器官水平的钙信号的观测具有独特的优势和广阔的前景。我们实验室在前一代GCaMP3的基础上,改造并发明了GCaMPJ这个最新的钙示踪蛋白。相比于GCaMP3,在in vitro实验中我们发现GCaMPJ具有更大的动态范围,对钙离子更高的亲和力和更高的荧光强度。进一步地,我们构建了心脏特异表达GCaMPJ的转基因小鼠。在离体灌流的心脏上,利用Zeiss的体视显微镜和滨松的高速成像sCMOS,我们观察了整体心脏的钙信号。在本次实验中,我们观察到了快速起搏(burst pacing)几分钟后,心脏室颤时整体心脏钙信号的紊乱。
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