本案例以成年C57小鼠急性分离所得心肌细胞在脉冲电刺激下的搏动为例,对于明场高速成像的数据进行时间序列分析。
实验材料制备:该样品为成年C57小鼠原代分离的心肌细胞,通过二型胶原酶消化液直接贯流小鼠主动脉制备,心脏经过消化液消化后,会有大量心肌细胞脱落,收集消化液并用BSA终止消化,通过离心将细胞分离纯化出来,经过培养基重悬后在培养液中继续吹打成单个细胞,再稀释到合适的浓度。
实验观察条件:制备好的样品需要滴加在特殊制作的带有电极的玻璃培养小室中,电极通电后可以通过外部设备进行控制,产生不同频率、电压的电脉冲刺激,使心肌细胞产生搏动。在倒置显微镜下找到状态良好的心肌细胞,便可以开始刺激观察,用高速相机记录搏动过程。
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